根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定,HIV-1抗體陽性報告必須由衛(wèi)生部認證并取得資格的HIV抗體確認實驗室出具才有法律效應(yīng)。
最常用的HIV-1抗體確認實驗方法是免疫印跡法(Wwstern Blot,WB)和條帶免疫印跡法(Strip Immunoblot Assay, SIA或Linear Immunoblot Assay, LIA),其中以WB法最常用。
1.免疫印跡法 H IV抗體確認的首選方法,他能同時檢測不同HIV-1抗原組分的抗體,因此能夠鑒別或肯定初篩檢測的結(jié)果。
2.條帶免疫印跡法 WB實驗基本相同,只是條膜上抗原來源和組成有所區(qū)別。檢測時信噪比高,本地清晰,無潛在假陽性干擾,且可通過調(diào)整條膜上HIV抗原量,克服了WB實驗中使用病毒裂解產(chǎn)物而可能產(chǎn)生的固相載體上某些重要抗原量不足的缺點。這類試劑特異性很高,但也可能由于病毒株在所合成抗原決定簇部位發(fā)生突變導(dǎo)致HIV抗體假陰性結(jié)果;另一個缺點是由于合成抗原不能糖基化,其立體構(gòu)像與天然抗原分子有一定差異,在一定程度上可能影響了模擬真實HIV抗原檢測抗體的能力。
HIV-1抗體確認實驗結(jié)果的評價 免疫印跡實驗的結(jié)果是根據(jù)硝酸纖維素條膜特異性HIV抗原位置上出現(xiàn)的帶型不同來判斷HIV抗體為陽性、陰性和不確定。
陽性和陰性結(jié)果的判斷標準:美國CDC的標準為國際公認。
陽性和陰性結(jié)果的判斷標準
HIV-1抗體陽性
HIV-1抗體陰性
僅gp41 沒有條帶;零星條帶
Gp120/gp160加上gp41或P24
HIV抗體不確定(或可疑)結(jié)果的評價 在某些情況下,樣品顯示不典型的HIV反應(yīng)性條帶圖譜,既不能確定為陽性也不能確定為陰性,稱為HIV抗體不確定或可疑陽性。
以下原因可能導(dǎo)致HIV-1抗體不確定結(jié)果的出現(xiàn):①HIV-1急性感染后,抗體剛出現(xiàn),僅顯示gp160或120,或P24,P31,P55帶;此時ELISA往往已顯示陽性反應(yīng);②非特異反應(yīng),如在高丙球蛋白血癥,某些病毒性疾病和寄生蟲感染,自身免疫性疾病等情況下可出現(xiàn)該現(xiàn)象;③極少數(shù)晚期艾滋病患者;④與HIV裂解物中的宿主細胞成分發(fā)生交叉反應(yīng);⑤樣本交叉污染。
對HIV抗體不確定的受檢者必須進行隨訪,通常為每3個月1次,共隨訪2次。如隨訪過程中出現(xiàn)特異性HIV抗體反應(yīng)條帶如gp160或120,則做出HIV-1抗體陽性結(jié)論。如隨訪6個月后帶型消失或沒有變化,則做出HIV抗體陰性報告
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